产品货号:
BTN80203
中文名称:
PAGE胶miRNA回收试剂盒
英文名称:
miRNA PAGE Gel Recovery Kit
产品规格:
30T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本试剂盒是利用PAGE胶过柱法回收microRNA(miRNA),可用于回收200nt以下的小片段RNA,尤其是20nt左右的microRNA(miRNA)分子。本试剂盒只能用于科研。
- 可以回收15~3000nt范围内的各种长度的RNA,包括100nt以下的miRNA片段。
- 柱式回收法,比沉淀法更见简单快捷。
- miRNA回收率在70%左右。
- 即开即用,操作简单,用户不需要自备任何试剂。
- 扩容性好,可小规模操作,也可以大规模操作。
组分 | 规格 |
miRNA PAGE胶回收溶液A | 9mL |
miRNA PAGE胶回收溶液B | 9mL |
miRNA PAGE胶回收溶液C | 9mL |
miRNA PAGE胶回收溶液D | 9mL |
通用洗柱液 | 50mL |
RNA洗脱液 | 10mL |
离心吸附柱 | 30个 |
保存:室温,有效期1年。
本试剂盒可以回收30次的miRNA。
PAGE胶、离心管、移液枪头
- 切取含miRNA片段的PAGE凝胶100mg左右(尽可能多地把多余的胶切除,否则会影响回收效率),放入1.5mL塑料离心管中,用先在酒精灯上口烧密闭的移液枪头尽可能将其捣碎,捣得越细越好。之后加入300μL miRNA PAGE胶回收溶液A。
- 将离心管水平放置并室温摇晃3小时以让miRNA从PAGE凝胶中扩散出来。
- 如果回收的RNA片段长度超过100nt,摇晃时间应适当延长。
- 提高温度到45~65℃,RNA扩散速度会增加。
- 如果回收的RNA片段长度超过100nt,摇晃时间应适当延长。
- 12000~15000g室温离心1~2分钟,将含RNA的上清液转移到一个新的5mL的塑料离心管中。
- 加入300μL miRNA PAGE胶回收溶液B、300μL miRNA PAGE胶回收溶液C和750μL miRNA PAGE胶回收溶液D混合均匀将离心管中的溶液分两次转移到离心吸附柱中,每次转移后都先静置3分钟,然后再12000~15000g离心1分钟,倒掉收集管中的液体。
- 加入700μL通用洗柱液于离心吸附柱中。12000~15000g离心1分钟,倒弃收集管中的废液。之后再12000~15000g离心半分钟以去除离心吸附柱中的残留液体。
- 将离心吸附柱置于一新的干净的离心管中,加入25~50μL RNA洗脱液,静置3分钟。12000~15000g离心1分钟,离心管底部所得溶液即为纯化的miRNA溶液,可立即用于后续实验或者放冰箱长期保存。
- 可以PAGE电泳检查回收效率,最好使用基因的高灵敏的超快核酸银染试剂染色以节约miRNA样品的用量。
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